实训6 显微测微尺的使用

【实训目标】熟练掌握显微测微尺的标化及使用方法;学会在显微镜下测量物体的大小。

【实训准备】

1.实训器具 显微镜、目镜测微尺、物镜测微尺、载玻片、盖玻片等。

2.实训材料 山药(或半夏)粉末、大黄粉末等。

3.实训试剂 稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。

【实训内容及步骤】显微测量常用的量尺为目镜测微尺与载物台测微尺。

1.目镜测微尺 简称目尺,为圆形玻璃片,直径18~20mm,中央有一标尺,长约5mm(或10mm),刻有精确等距离的平行线,常为50(或100)条(图1-3)。目尺是放在目镜内用以直接测量物体用的标尺,其刻度所代表的长度依显微镜放大倍数不同而改变,故使用前必须用载物台测微尺标化,以确定在使用该显微镜及其特定的物镜、目镜和镜筒长度时,目尺每小格所代表的实际长度。

图1-3 目镜测微尺

2.载物台测微尺 简称台尺,为长方形玻璃片,中央有一小圆形玻片,其下封藏一微型标尺,全长1mm(或2mm),上面刻有精确等分为100(或200)小格的细线,每一小格长10μm(图1-4)。台尺是用以标化目镜测微尺的,不能直接测量物体的大小。

图1-4 载物台测微尺

3.目镜测微尺的标化 将台尺置于显微镜载物台上,按常规对光调焦,并移动测微尺物象于视野中央;将目尺放入目镜筒中部的光栏上。这时,视野中可同时观察到台尺和目尺的刻度小格,移动台尺和旋转目镜,使二量尺的刻度平行。左边的“0”刻度重合,寻找第二条重合刻度(图1-5)。记录两刻度的读数,并根据两个量尺左右两条重合线间小格数的比值,计算出目尺每小格在该物镜条件下所相当的长度(μm)。计算公式:

图1-5 视野中目微尺与台微尺的重合线

为减少误差,计算目尺每小格所相当的长度时,可寻找多个重合刻度,记录多组数据,求其平均值。更换显微镜或目镜、物镜时,均须重新标化目微尺每小格所相当的长度。

4.测量方法 目尺标化后,将台尺取下,换上装有药材粉末的显微标本片。对光,调焦,移动标本片,使待测物置于目尺范围内,数出待测物占目尺的小格数,乘以目尺在该条件下每小格相当的长度值,即得。例如:接目镜头为10 ×,接物镜头为40 ×时,测得淀粉粒直径占目微尺9小格,则该淀粉粒的直径为3.8μm×9=34.2μm。

【实训报告与考核】测出所用显微镜的高、低倍镜的目尺每小格所代表的长度,并记录;测出山药(或半夏)淀粉粒、大黄草酸钙簇晶的直径及山药(或半夏)草酸钙针晶的长度。