腓力二世去世以后，亚历山大年仅二十岁便即位为马其顿王。他遗传了父亲腓力二世坚忍的意志、果敢的实践力和灵活的脑筋运用，从母亲那里遗传了热情的权力欲。他的父亲腓力二世很早就认识到亚历山大这些优美的特性，而施以天下最好的教育。他十三岁时，父亲便聘请当时的大学者亚里士多德做他的家庭教师。
亚里士多德是柏拉图最有成就的学生，直到公元前347年柏拉图去世时，他一直在雅典师事柏拉图约二十年。柏拉图去世后，他才在小亚细亚西岸各地讲学。他只教过亚历山大三年。这时，他曾撰写一部闻名后世的《政治学》，公开批评老师柏拉图的《理想国》，还讨论到当时政治。亚历山大从他那儿得到了伦理学与政治学的启蒙。但是，老师的感化不止于此，他后来远征波斯时，曾不时地写信，而且喜欢读书。他的枕头底下，除了放把短剑之外，还常放着一本荷马的《伊利亚特》。他远征亚洲时，还常让人从希腊送来希腊三大悲剧诗人的作品等。他对希腊文化如此喜爱，也许是得之于亚里士多德的感化。
但是，最值得注意的是他对自然科学的兴趣。留传至今的亚里士多德著作是他离开马其顿在雅典传授学生的讲稿。这些作品决不限于今日所谓的哲学，还遍及于天文学、生物学等知识。他的为学方法与柏拉图很不同，注视经验事实，而后进行归纳研究。他是古今最博学的人，也是能把以前知识系统化的人。
亚历山大远征军中常有学者从军，以便记录第一次看见的动植物与地理。进入埃及时，还送调查队到尼罗河上游调查，获知尼罗河定期泛滥是因阿比西尼亚的季节性豪雨所致。不仅如此，他的远征军还带有探险旅行的性质，对希腊化时代的地理学等自然科学的发展有极大的贡献。这大概也是受到亚里士多德的影响。
对当时政治，据说亚里士多德曾留给亚历山大一句忠言：“像朋友般，对待希腊人；像处理动植物一样，对待亚洲的异民族。”从他所著的《政治学》来看，这句话也许是真实的。他在《政治学》的开头便说：“工具不会自动工作，所以奴隶是不可缺少的。这绝不是违反自然。”而且还说亚洲人民只是男奴隶与女奴隶的群集。这也许就是希腊人购买奴隶的一种理论表现。因此，亚里士多德才会对亚历山大说出那样的忠言。但是，亚历山大对这句忠言采取什么样的态度呢？亚历山大东征时，为了建立自己的专制体制，会采纳波斯的制度和仪式；为统治波斯，曾娶波斯王之女为妃，并命文武将领娶波斯女人为妻；为传播希腊文化，鼓励希腊人移民亚、非两洲。从这些方面看，亚历山大为了政治目的，为了建立横跨欧亚非的大帝国，似乎没有采纳亚里士多德的民族差别待遇政策。