2.1.3　指标分析

发酵体系样品用两层纱布过滤后，固渣中TS和VS含量根据APHA[150]方法分别在105℃和550℃温度下分析，计算降解率；固渣通过脱水、干燥及金属镀膜后用SEM观察。发酵前后秸秆中纤维素、半纤维素及木质素含量用A2000i纤维分析仪（ANKOM，美国）测定，中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）及酸不溶性木质素（ADL）残渣都在65℃干燥箱中烘至恒重。

液体部分在12000r/min下离心10min，上清液用于pH、VFAs浓度和酶活性测定，每个指标重复三次。使用DELTA 320 pH计测定（梅特勒-托利多仪器，美国）。VFAs测定前用0.83g/L 4-甲基戊酸、3mol/L磷酸和样品按同体积混合后4800r/min离心10min；所得上清液使用GC-2010 Plus气相色谱（岛津，日本）测定VFAs（主要包含乙酸、丙酸和丁酸），色谱配备Stabiwax-DA毛细管柱（30m×0.32mm×0.5μm，大连中汇达科学仪器，中国）和火焰离子化检测器（FID）。程序包括初温80℃，3min；然后以15℃/min的速率升至210℃，2min；进样和检测器温度设为250℃[151]。纤维素酶和木聚糖酶活性测定根据Sambusiti等（2014）方法测定[148]，单位为U/mL。每毫升每分钟上清液释放1 μg葡萄糖（木糖）的酶量定义为1个酶活力单位（U）。