任务五　观察放线菌的形态

一、任务分析

放线菌是生产抗生素最重要的微生物种类之一，其形态特征是菌种选育和分类的重要依据，为此，人们曾设计多种方法来培养和观察它的形态特征，其中以插片法较为有效。在接种放线菌的琼脂平板上，插上盖玻片，由于放线菌的菌丝可以沿着培养基与盖玻片的交界线蔓延生长，从而较容易地黏附在盖玻片上，待培养物成熟后再轻轻地取出盖玻片，就能获得在自然状态下生长的直观标本，若将它置于载玻片上（让含培养物的面朝上）做显微镜检查，就可观察到放线菌在自然状态下着生的菌丝体的各种形态特征（图2-29）。

二、任务实施

1．明确目标

（1）学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。

（2）培养学生规范操作和无菌意识。

2．任务准备

（1）器材　培养皿、盖玻片、载玻片、镊子、接种环、显微镜等。

（2）试剂　高氏1号琼脂培养基。

（3）材料　青色链霉菌（S.glaucus），弗氏链霉菌（S.fradiae）。

3．实施方案

插片法

（1）倒平板　取熔化后冷却至50℃的高氏1号琼脂培养基约20mL倒平板，冷凝待用。

（2）接种　无菌操作，用接种针挑取菌种培养物在平板上划线接种，划线要密，不能交叉。

（3）插片　以无菌操作法用镊子将无菌盖玻片在接种线处以45°倾斜插入培养基内，深度约为盖玻片的1/3长度即可（图2-30），每个平板插入3个盖玻片。

（4）培养　将插片平板倒置于28℃恒温箱中培养3～7天。

（5）镜检　用镊子小心取出盖玻片，并将其背面附着的菌丝体擦净，然后将盖玻片无菌丝体的面放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜或油镜观察，并与图2-31、图2-32的链霉菌菌丝形态做一比较。

4．结果分析

（1）将放线菌的形态观察结果记录在表2-19中。

（2）绘图表示孢子丝。

三、任务评价

对照标准（表2-20）自我评价，小组评价，检查任务完成情况。

四、注意事项

（1）放线菌的生长速度较慢，培养周期较长。操作时应特别注意无菌操作。严防污染杂菌。

（2）若将培养后的盖玻片用0.1%亚甲蓝染色后再做镜检，则效果更好。

（3）镜检时请特别注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。