学习活动三　实施检测

建议学时：48学时

学习要求：按照检测实施方案中的内容，完成地表水中氨氮的含量测定，分析过程中符合安全、规范、环保等5S要求，具体要求见表1-16。

一、安全注意事项

1.请回忆一下，我们之前在实训室工作时，有哪些安全事项是需要我们特别注意的？现在我们要进入一个新的实训场地，请阅读《实验室安全管理办法》总结该任务需要注意的安全事项。

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2.完成下题

（1）遵守实验室管理制度，禁止__________操作。

（2）洗涤玻璃仪器规范操作，防止__________划伤。

（3）化学试剂安全使用，防止__________腐蚀。

（4）用电注意安全，防止__________。

3.配制氢氧化钠溶液的安全注意事项

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◆HgCl2和HgI2为剧毒物质，须避免经皮肤和口腔接触。

试剂的配制中，注意化学试剂的腐蚀，做好个人防护。严格遵守实验室操作规章制度。在制备该溶液时，必须戴好护目镜和手套，制备完溶液后，除将手套统一处理外，还要注意及时洗脸和洗手。

此外，要注意环境、试剂和蒸馏水中含有氨氮，防止干扰测定结果。进行氨氮分析的实验室，室内不应有扬尘、铵盐类化合物，不要与硝酸盐氮等分析项目同时进行，因为硝酸盐氮测试中必须使用氨水，而氨水的挥发性很强，纳氏试剂吸收空气中的氨而导致测试结果偏高。所使用的试剂、玻璃器皿等实验用品要单独存放，避免交叉污染，影响空白值。

二、配制溶液

（一）试剂溶液制备问题

实验室用水应该用什么样的水？该项目检测对实验分析用水有什么要求？

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（二）请完成实验用溶液的配制，并做好数据记录（表1-17）。

1.填表

2.无氨水纯度的检验方法。

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3.参照标准HJ 535—2009，说出选择HgI2-KI-NaOH配制纳氏试剂的操作要点。

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4.如何配制1mL含1.00mg氨氮的标准贮备液1000mL？

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（三）填写溶液确认表（表1-18）。

三、确认仪器状态

1.填写仪器确认单（表1-19）。

2.熟练掌握仪器使用方法（表1-20）。

3.比色皿成组性测试

将波长选择至实际使用的波长__________上，将一套比色皿都注入蒸馏水，将其中一只的透射比调至100％处，测量其他各只的透射比，凡透射比之差不大于0.5％，即可配套使用。检查记录见表1-21。

四、检测方法验证

1.利用仪器，进行吸收曲线的绘制。

（1）填写实验记录表。

（2）绘制吸收曲线，寻找最大吸收波长。

2.进行氨氮质控样检测，检测记录（表1-23）。

3.以氨氮的含量为横坐标，以测得的对应的吸光度扣除空白的试验的吸光度坐标绘制工作曲线。

4.从工作曲线上查出测得质控样的氨氮含量与质控样真实值比较，计算出误差及相对误差。

质控样值__________　测定值__________

误差=

　　相对误差=

要求相对误差≤

五、样品预处理

水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质，影响氨氮的测定。为此，在分析时需作适当的预处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀法；对污染严重的水或工业污水，则用蒸馏法消除干扰。

1.水样预处理方法__________

2.絮凝沉淀法__________

（1）实验原理　加适量的硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使呈__________，生成__________沉淀，再经过滤除去颜色和浑浊等。

（2）实验步骤　取__________水样，加__________溶液，加__________溶液，调节pH至__________左右，混匀静置沉淀过滤，弃去初滤液__________。

六、实施分析检测

试验步骤

1.水样预处理絮凝沉淀法

取100mL水样，加入1mL10％硫酸锌溶液、25％的NaOH溶液，调节pH值至10.5左右，混匀，静置沉淀，过滤（弃去初滤液20mL）。

2.校准曲线的绘制

（1）配置铵标准使用液　移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶，定容。此溶液浓度为0.010mg/mL。

（2）标准色列配置　移取0.00mL、0.50mL、1.00mL、3.00mL、5.00mL、7.00mL和10.0mL铵标准使用液于50mL比色管中，加水至标线；加入1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀。加入1.5mL纳氏试剂，混匀；放置显色10min后，在波长420nm处，用光程10mm比色皿，以无氨水为参比，测量吸光度。

（3）绘制标准曲线　由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮（mg）对校正吸光度的校准曲线。

3.水样的测定

取适量经预处理后的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50mL比色管中，稀释至标线，加入1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀；加入1.5mL纳氏试剂，混匀；放置10min后，在波长420nm处，用光程10mm比色皿，以蒸馏水为参比，测量吸光度。

4.计算由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含量（mg）。

七、填写原始记录表

1.填写标准工作曲线溶液制备原始记录表（表1-24）。

2.填写水样检测原始记录（表1-25）。

3.绘制标准曲线，从绘制的工作曲线查出水样样品中校正吸光度对应的m值，计算出水样样品的总磷含量、极差和相对极差。

要求有计算过程。

4.计算由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含量（mg）。

式中　mx——由校准曲线查得的氨氮量，mg；

　　　V——水样体积，mL。

注意事项如下。

（1）纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。

（2）滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。

八、教师考核记录表（表1-26）

九、环节评价（表1-27）